PCR analizi nedir?
Polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) analizi, amplifikasyon olarak bilinen bir işlemle, bir numunedeki az miktarda DNA'yı tanımlamak için tasarlanmış bir laboratuvar tekniğidir. PCR amplifikasyonu sırasında, ilgilenilen DNA analiz ve tespit için yeterli olana kadar tekrar tekrar kopyalanır. Örneğin, PCR, idrar örneğinde bulunan gonore veya klamidyaya neden olan organizmalardan küçük miktarlarda DNA'yı tanımlamak için kullanılabilir.
PCR nasıl çalışır?
PCR'deki ilk adım, numuneyi ısıtarak çift iplikli DNA'nın iki tek iplik halinde ayrılmasıdır - buna denatürasyon denir. Daha sonra, primerler , ilgilenilen DNA sekansının uçlarına uyan kısa DNA örnekleri, örnek DNA ile birleştirilir. Bundan sonra, primer konumunda DNA replikasyonunu başlatmak için bir DNA polimerazı kullanılır. Son olarak, DNA şeritleri bir kez daha ayırmak için ısıtılır ve tüm PCR işlemi tekrar başlar.
Numunede mevcut olan DNA segmentinin miktarı her PCR siklusu ile üssel olarak artar: bir kopya iki olur, sonra dört olur, sonra sekiz olur, vb. Genel olarak, söz konusu DNA'nın mevcut olup olmadığını (ve eğer analiz için yeterli bir örnek sağlamak gerekirse) belirlemek için sadece 20 ila 40 döngü gereklidir.
Bir polimeraz zincir reaksiyonunun tüm aşamaları - DNA'yı denatüre etmek, primerleri uygulamak ve DNA'yı uzatmak - farklı sıcaklıklarda gerçekleşir, böylece ilk karışımın bir araya getirilmesinden sonra, basamaklar termoseçleme olarak bilinen bir süreçle kontrol edilebilir. Her adımın gerçekleştirilebilmesi için sıcaklığın gerekli seviyelerde tutulması yeterlidir.
Böylece, PCR, insan müdahalesine çok az ihtiyaç duyulan tek bir test tüpünde hedef DNA miktarının amplifiye edilmesinin etkili bir yoludur.
Polimeraz zincir reaksiyonu, 1980'lerin başında ilk olarak geliştirildiği zaman biyolojik teknikte bir devrimi temsil etti ve PCR'ın yaratıcısı Kary Mullis, 1993'teki çalışmaları nedeniyle Kimyada Nobel Ödülü'nü kazandı.
PCR neden STD Testi ile ilgilidir?
Polimeraz zincir reaksiyonu ve ligaz zincir reaksiyonu gibi ilgili teknikler, STD testi için artan bir önemi olduğunu kanıtlamaktadır. Bunun nedeni, bu tekniklerin örneklerde küçük miktarlarda viral DNA veya RNA'yı doğrudan tanımlayabilmesidir. Bir patojenin genetik kodunu tanımlamak, patojenin canlı olmasını ister - bakteri kültürü veya viral kültür gibi . Ayrıca, enfeksiyonun insanlar için saptanabilir bir antikor reaksiyonu geliştirmesi için yeterince uzun bir süre önce gerçekleşmesini gerektirmez (örneğin ELISA ile tespit edilir). Bu, PCR tekniklerinin bazen diğer testlerden daha önce hastalıkları tespit edebildiği anlamına gelir. numunelerin canlı tutulması ya da tam olarak doğru zamanda test edilmesi konusunda endişelenmeniz gerekir.